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Métodos basados en ZFN, TALEN y CRISPR/Cas para la ingeniería genómica.

Posted on December 8, 2022 by Zoe

Las nucleasas de dedos de zinc (ZFN) y las nucleasas efectoras similares a activadores de la transcripción (TALEN) constituyen una potente clase de instrumentos que podrían estar redefiniendo los límites del análisis orgánico. Estas nucleasas quiméricas se componen de módulos de unión al ADN programables y específicos para cada secuencia, unidos a una zona de corte del ADN inespecífica.

DiscoveryProbe? DNA Damage/DNA Repair Library
L1033-.1 ApexBio
DiscoveryProbe? DNA Damage/DNA Repair Library
L1033-.25 ApexBio
DiscoveryProbe? DNA Damage/DNA Repair Library
L1033-5 ApexBio
T7 DNA
310-005 GeneOn
T7 DNA
310-025 GeneOn
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ZFNs y TALENs permiten una amplia variedad de modificaciones genéticas mediante la inducción de roturas de doble cadena de ADN que estimulan error propenso a terminar no homóloga convertirse en un miembro de la homología o dirigida a la restauración en determinadas zonas genómicas. Aquí, la evaluación de los logros potenciales por sitio específico de nucleasa ciencias aplicadas y se centran en los propósitos de los reactivos para la evaluación genética y la manipulación.

Protein G Protein
Abbexa
Protein G Protein
Abbexa
Protein L Protein
Abbexa
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Además, destacamos el potencial terapéutico de ZFNs y TALENs y nos centramos en las perspectivas de futuro para el sector, junto con la aparición de la repetición palindrómica rápida agrupada reguladora interespaciada (CRISPR)/Cas basado en endonucleasas de ADN guiadas por ARN. Las nucleasas que escinden secuencias genómicas distintivas en células vivas pueden utilizarse para la mejora y mutagénesis de genes específicos.

Beta2-Microglobulin ELISA kit ELISA Kit
LF-EK60047
Human IL-17E ELISA Kit ELISA kit
E22-HC180.48
Human IL-17E ELISA Kit ELISA kit
E22-HC180.96
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Aquí desarrollamos un método para producir tales reactivos basado principalmente en proteínas efectoras similares a activadores de la transcripción (TALE) de Xanthomonas. Determinamos variantes de truncamiento de TALE que cortan eficazmente el ADN cuando se unen a la zona catalítica de FokI y utilizamos estas nucleasas para generar ediciones discretas o pequeñas deleciones dentro de los genes NTF3 y CCR5 humanos endógenos con eficiencias de hasta el 25%. Además, presentamos que las TALEs diseñadas pueden regular genes endógenos de mamíferos. Estas investigaciones revelan la eficiente utilidad de los componentes de transcripción y nucleasas TALE diseñados para la regulación y modificación focalizada de genes endógenos.

Paraffin Wax Dispenser
Scientific Laboratory Supplies
Paraffin wax, granular (56 - 60)
Glentham Life Sciences
Paraffin wax, granular (56 - 60)
Glentham Life Sciences
Paraffin wax, granular (56 - 60)
Glentham Life Sciences
Paraffin wax, granular (56 - 60)
Glentham Life Sciences
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Efficient design and meeting of customized TALEN and different effector-based constructs for DNA focusing on.

Los TALEN son nuevos instrumentos necesarios para la ingeniería genómica. Fusiones de efectores similares a activadores de la transcripción (TAL) de Xanthomonas spp. fitopatógenas con la nucleasa FokI, los TALEN se unen y cortan el ADN por pares. La especificidad de unión se establece mediante matrices personalizables de repeticiones polimórficas de aminoácidos dentro de los efectores TAL. Presentamos un método y reactivos para ensamblar eficazmente construcciones TALEN con matrices de repeticiones personalizadas.

MULTIPLEX KIT PCR MASTITIS PCR kit
Bioingentech
MULTIPLEX KIT PCR MASTITIS PCR kit
Bioingentech
PCR Mix
Biochain
PCR SuperMix
Abbexa
PCR Enhancer
Vazyme
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Además, describimos consejos de diseño basados principalmente en efectores TAL naturales y sus sitios web de unión. Usando un programa de software que aplica estos consejos, en 9 genes de vegetación, animales y protistas, descubrimos sitios web de corte candidatos en común cada 35 pb. Cada uno de los 15 sitios web elegidos de este conjunto fue escindido en un ensayo basado en levadura con pares TALEN construidos con nuestros reactivos.

Beta2-Microglobulin ELISA kit ELISA Kit
Abfrontier
Human IL-17E ELISA Kit ELISA kit
EnoGene
Human IL-17E ELISA Kit ELISA kit
EnoGene
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ZFN, TALEN, and CRISPR/Cas-based methods for genome engineering.

Human LAG-3 ELISA ELISA Kit
E16HE0310 EnoGene
Rat beta amyloid elisa ELISA Kit
SL1392Ra Sunlong
Plant starch, Amy ELISA ELISA Kit
SL0090PI Sunlong
Human Galectin-1 ELISA ELISA Kit
E16HE0311 EnoGene
Plant ketoolase, TK ELISA ELISA Kit
SL0105PI Sunlong
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Utilizamos dos de los pares TALEN para mutar HPRT1 en células humanas y ADH1 en protoplastos de Arabidopsis thaliana. Nuestros reactivos incluyen un plásmido ensamblado para fabricar efectores TAL personalizados y otro para fusiones de efectores TAL a proteínas adicionales de interés. Utilizando el anterior, construimos de novo un análogo útil de AvrHah1 de Xanthomonas gardneri.

El conjunto completo de plásmidos está disponible a través del repositorio sin ánimo de lucro AddGene y un modelo basado en la web de nuestro programa de software es de libre acceso en línea. Los componentes de desarrollo de fibroblastos (FGFs) y sus receptores gestionan una variedad de capacidades orgánicas, regulando la proliferación, supervivencia, migración y diferenciación móvil.

Aunque la focalización en la señalización del FGF como objetivo terapéutico en la mayoría de los cánceres ha ido a la zaga de la de otros receptores tirosina quinasas, puede haber ahora pruebas sustanciales de la importancia de la señalización del FGF en la patogénesis de numerosos tipos de tumores, y se están desarrollando reactivos científicos que se dirigen particularmente a los FGF o a los receptores del FGF.

Human LAG-3 ELISA ELISA Kit
E16HE0310 EnoGene
Rat beta amyloid elisa ELISA Kit
SL1392Ra Sunlong
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Acciones antivirales de los interferones.

Se ha avanzado enormemente en la comprensión de los fundamentos moleculares de las acciones antivirales de los interferones (IFN), además de los métodos utilizados por los virus para antagonizar las acciones de los IFN. Por otra parte, los avances realizados mientras que la elucidación del sistema IFN han contribuido considerablemente a nuestra comprensión en una serie de áreas de la virología y la biología celular molecular, a partir de las vías de transducción de señales a los mecanismos bioquímicos de gestión transcripcional y traslacional a la base molecular de la patogénesis viral. Los IFN son terapéuticos permitidos y han pasado del laboratorio de análisis fundamental a la clínica.

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22332 National Diagnostics
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aaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaa National Diagnostics
Diogenes Kit
NAT1000 National Diagnostics
Hydrogen Peroxide Assay Kit
NAT1002 National Diagnostics
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Entre las proteínas inducidas por IFN necesarias dentro de las acciones antivirales de los IFN se encuentran la proteína cinasa dependiente de ARN (PKR), la dos’,5′-oligoadenilato sintetasa (OAS) y la RNasa L, y la proteína Mx GTPasas. ARN de doble cadena realiza una posición central en la modulación de la fosforilación de proteínas y la degradación del ARN catalizada por el IFN-inducible PKR quinasa y la dos’-5′-oligoadenilato-dependiente de la RNasa L, respectivamente, y, además, en la mejora de ARN por el IFN-inducible ARN-específico adenosina deaminasa (ADAR1).

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Diogenes Kit
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IFN, además, induce un tipo de óxido nítrico sintasa inducible (iNOS2) y la principal histocompatibilidad avanzada de clase I y II proteínas, todas las cuales desempeñan papeles necesarios en la respuesta inmune a las infecciones. Varios genes adicionales cuyos perfiles de expresión se alteran en respuesta a IFN remedio y virus de una infección han sido reconocidos por los análisis de microarrays.

La disponibilidad de ADNc y clones genómicos para la mayoría de los elementos del sistema IFN, junto con IFN-alfa, IFN-beta e IFN-gamma, sus receptores, Jak y Stat y elementos de transducción de señales IRF, y proteínas correspondientes a PKR, 2′,5′-OAS, Mx, y ADAR, cuya expresión está regulada por IFNs, ha permitido la tecnología de las proteínas mutantes, las células que sobreexpresan totalmente diferentes tipos de las proteínas, y los animales por los que su expresión ha sido interrumpido por la interrupción de genes centrado.

El uso de estos reactivos del sistema IFN, tanto en la tradición celular como en animales completos, sigue ofreciendo contribuciones necesarias para nuestra comprensión de la interacción virus-huésped y la respuesta antiviral móvil.

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